مساعد السلطان
مساعد السلطان

@MUSAAED_2

12 تغريدة 3 قراءة Aug 22, 2022
من التقنيات المهمة في المختبرات هي تقنية الاستنساخ او Cloning، سلسلة مقاطع مترجمة تشرح بشكل مفصل مالذي يحدث في هذه التقنية، اضافة الى تطبيق على Kit من شركة Thermo Fisher Scientific
بداية ماهي فكرة الاستنساخ؟
هي ان نقوم بادخال قطعة صغيرة من الحمض النووي الى قطعة اخرى من الحمض النووي تمتلك ميزة انها تستطيع الاكثار من الاولى، ولكن لكي يتم ذلك هناك شروط منها:
١- وجود قطعة الحمض النووي المراد الاكثار منها DNA Fragment
٢- وجود انزيم القص Restriction enzymes و انزيم الربط ligase enzymes
٣- الناقل و يوجد منه انواع هي:
- البلازميدات plasmid
-نواقل الكروموسومات الصناعية مثل
كروموسوم البكتيريا الصناعي، كروموسوم الخميرة الصناعي
-البكتيريوفاج
٤- وجود الخلية المضيفة التي ستحوي هذه العملية
والعملية اشبه مايكون عندما يكون لديك ورقة مهمة في كتاب قديم لكن احرفها صغيرة و لايوجد منها اي نسخة وتريد اخذ نسخ كثيرة منها، "ستكون الورقة هي قطعة الحمض النووي" قبل نسخ الورقة سنحتاج الى تكبير الاحرف الصغيرة
وهذا ماسانفعله قبل البدء في العملية وذلك بواسطة PCR نضخم الحمض النووي المطلوب اكثاره، الان آلة التصوير هي "الناقل" وستكون الغرفة التي تحتوي على الآلة والورقة هي الخلية المضيفة.
الان ننتقل الى المعمل، في هذا المقطع
تم الحديث عن تقنية الاستنساخ وعن الـ Kit مثل محلول Salt solution و محلول TOPO مع التحضير المسبق لـ PCR product، وذلك مع "جيف" الذي سيقوم بتفاعل الـ Cloning "الاستنساخ
هنا الحديث بشكل مفصل عن ماذا يحدث داخل الانابيب بعد عملية التحضّين لمدة خمس دقائق، وكيف تحدث عملية القص والربط بواسطة الانزيم لقطعة الحمض النووي بطريقة انيميشن
في هذا المقطع يتحدث عن اهمية تضخيم PCR product وانه كلما كان خالي من التلوث كانت نتائج الاستنساخ اكثر دقة، وعن Kit TOPO TA Cloning يستخدمه بعض الباحثين في بعض الحالات.
الان الخطوة الاخيرة وهي بعد التحضّين لخمس دقائق، يكون الربط قدم تم، الان يتم نقل الاي كلوي و ناقل الـTOPO الذي يحوي قطعة الحمض النووي الى الطبق، للسماح لهم بالنمو.
ماهي استخدامات الـ Cloning؟
-في صناعة الدواء مثل الانسولين، بعض الهرمونات مثل هرمون النمو والذي بعض المرضى لايستطيع جسمهم صناعته.
-العلاج الجيني، والذي يستخدم لبعض المرضى الذين يعانون من خلل عمل بعض الجينات لديهم
-تحليل الجينات وذلك لعمل نسخه من بعض الجينات لمعرفة طريقة عملها

جاري تحميل الاقتراحات...