أي شخص حاب يعرف عن DNA Cloning 🧬 وكيف يتم وإيش أهميته، هالثريد بيكون مرجع مناسب، ومبسط بشكل مفهوم لكل مايتعلق فيه 🤩⬇️
DNA Cloning عملية تكوين نسخ متطابقة لجزء معين من DNA ومثال على ذلك الجين
DNA Cloning تتم لعدة أسباب من أهمها
• تحديد الطفرات الجينية
• القدرة على تحديد Sequence معينة
• دراسة وظائف بعض البروتينات والإنزيمات
• تكوين نسخ متطابقة لبعض الخلايا أو الأعضاء لأغراض علاجية متعددة
DNA Cloning تتم لعدة أسباب من أهمها
• تحديد الطفرات الجينية
• القدرة على تحديد Sequence معينة
• دراسة وظائف بعض البروتينات والإنزيمات
• تكوين نسخ متطابقة لبعض الخلايا أو الأعضاء لأغراض علاجية متعددة
بشكل عام DNA Cloning يتم من خلاله إدخال الجين المراد نسخه الى Plasmid
في هالثريد شرحت كل ما يتعلق بمايسمى Plasmid
في هالثريد شرحت كل ما يتعلق بمايسمى Plasmid
Cloning عادةً يمر بمراحل كالتالي
• قطع كلاً من Plasmid و DNA بنفس Restriction enzyme
• في Plasmid يحدث القطع في منطقة تسمى Restriction site
•ينتج عن هذا القطع مايسمى Sticky ends تسهل إندماج DNA مع Plasmid
• يُستخدم إنزيم (Ligase) لربط DNA مع Plasmid
• قطع كلاً من Plasmid و DNA بنفس Restriction enzyme
• في Plasmid يحدث القطع في منطقة تسمى Restriction site
•ينتج عن هذا القطع مايسمى Sticky ends تسهل إندماج DNA مع Plasmid
• يُستخدم إنزيم (Ligase) لربط DNA مع Plasmid
• بعد إندماج كلاً من Plasmid و DNA ينتج مايسمى Recombinant DNA
• يتم نقل Recombinant DNA إلى عائل غالباً تكون بكتيريا E.coli
• عملية نقل Recombinant DNA إلى الخلية العائل تسمى Transformation
الخطوات موضحة في الصورة ⬇️
• يتم نقل Recombinant DNA إلى عائل غالباً تكون بكتيريا E.coli
• عملية نقل Recombinant DNA إلى الخلية العائل تسمى Transformation
الخطوات موضحة في الصورة ⬇️
Transformation طريقين
• الطريقة الكيميائية عن طريق CaCl2 والحرارة تسهيل دخول DNA إلى الخلية العائل
• أو الطريقة الكهربائية (Electroporation) وتعتمد على الومضات الكهربائية
• الطريقة الكيميائية عن طريق CaCl2 والحرارة تسهيل دخول DNA إلى الخلية العائل
• أو الطريقة الكهربائية (Electroporation) وتعتمد على الومضات الكهربائية
Plasmid يحتوي على Antibiotic resistance gene بدوره يساعد البكتيريا على البقاء حية ومقاومةOther Specific antibiotic
• البكتيرياء المحتوية على plasmid تبقى حية على شكل مستعمرات بكتيرية في حين أن البكتيريا الغير محتوية على plasmid تموت
• البكتيرياء المحتوية على plasmid تبقى حية على شكل مستعمرات بكتيرية في حين أن البكتيريا الغير محتوية على plasmid تموت
في النهاية فيه سؤال مهم، وهو ليش نستخدم بكتيريا E.coli مقارنة بغيرها من البكتيريا غالباً لسببين 🤩👌🏻
1- تنمو بشكل أسهل
2- تكوينها الجيني مفهوم جيداً
1- تنمو بشكل أسهل
2- تكوينها الجيني مفهوم جيداً
جاري تحميل الاقتراحات...