📌ماهو الـ
?Real-Time PCR
هو تفاعل يهدف لتضاعف وتزايد في اعداد نسخ قطع DNA او الجين المراد زيادته مع وجود الصبغات المشعة التي ترصد هذه العملية لأجل اعطاء تقرير مفصل عن عدد الدورات ومايقابلها من تزايد وتضخم لنسخ الجين المستهدف
يتبع1️⃣
?Real-Time PCR
هو تفاعل يهدف لتضاعف وتزايد في اعداد نسخ قطع DNA او الجين المراد زيادته مع وجود الصبغات المشعة التي ترصد هذه العملية لأجل اعطاء تقرير مفصل عن عدد الدورات ومايقابلها من تزايد وتضخم لنسخ الجين المستهدف
يتبع1️⃣
هناك عدة طرق نستطيع من خلالها متابعة ورصد تضاعف الـDNA في العينة،حيث تستخدم المؤشرات المضيئة fluorescent marker للارتباط مع الDNA المتضاعف وكلما زادت اشرطة DNA المنسوخة زاد استعمال الصبغة المشعة
📍اهمها:
الصبغات المضيئة(Fluorescent dyes) و البروب المشع (Fluorescent probes)
يتبع2️⃣
📍اهمها:
الصبغات المضيئة(Fluorescent dyes) و البروب المشع (Fluorescent probes)
يتبع2️⃣
لذلك تعتبر استعمال هذه #التقنية فعالة بسبب القدرة على مشاهدة عمليات التضاعف والاستغناء عن عملية ترحيل ال DNA في الاجاروز جل.
يتبع3️⃣
يتبع3️⃣
📌ماهو الفرق بين الصبغات المضيئة (Fluorescent dyes) و البروب المشع (Fluorescent probes)؟
📍اهم الطرق التي تساعدنا في رصد تضاعف الـ DNA :
يتبع4️⃣
📍اهم الطرق التي تساعدنا في رصد تضاعف الـ DNA :
يتبع4️⃣
1-الصبغات المضيئةFluorescent dyes: استعمال الصبغةالمشعة في تقنية RT-PCR يعتبر الاقل تكلفة والاسهل لرصد التضاعف حيث ارتباط هذه الصبغةيتزايد مع تزايد اشرطةالDNAالمزدوجةالمنسوخة حديثالكن الغير مرغوب في هذه الطريقةهو ان الصبغة ترتبط مع اي تضاعف لاشرطة DNA بدون تخصيص للجين المطلوب
5️⃣
5️⃣
2- البروب المشع Fluorescent probes
هو قطعة من الDNA مكملة للجين المطلوب تضاعفه وتكاثره حيث تكون معلمة بالصبغة المشعة
يعد التاكمان/Taqmanالبروب الاكثر شيوعا حيث يتكون من قطعةمن الDNA تحتوي على جزيئة(Reported) مشع في احد الاطراف وجزيئة(Qencher) ماصة للاشعاع في طرفها الاخر
يتبع6️⃣
هو قطعة من الDNA مكملة للجين المطلوب تضاعفه وتكاثره حيث تكون معلمة بالصبغة المشعة
يعد التاكمان/Taqmanالبروب الاكثر شيوعا حيث يتكون من قطعةمن الDNA تحتوي على جزيئة(Reported) مشع في احد الاطراف وجزيئة(Qencher) ماصة للاشعاع في طرفها الاخر
يتبع6️⃣
ال(Reported) وال(quencher) سوف ينفصلان فيزيائيا ثم سيتزايد انبعاث الاشعاع بسبب ابتعاد quencherعن Reported حيث يبدأ الاخير بالاشعاع بصورة طبيعية.
8️⃣
8️⃣
جاري تحميل الاقتراحات...