هل تساءلت يوماً لماذا بعض الأدوية تختلف قوة فعاليتها أو وقت التأثير الدوائي الفعال بها؟!
في هذا الثريد سنتحدث عن كيفية قياس قوة ارتباط الدواء مع الجزيء الحي في الجسم ووقت حدوث الفعالية الدوائية باستخدام التجارب المعملية والتي بدورها تؤثر على الفعالية
في هذا الثريد سنتحدث عن كيفية قياس قوة ارتباط الدواء مع الجزيء الحي في الجسم ووقت حدوث الفعالية الدوائية باستخدام التجارب المعملية والتي بدورها تؤثر على الفعالية
يتم قياس قوة ارتباط المركب الدوائية (agonist) أو (antagonist) على مستوى في الخلايا بعدة مراحل:
1- استخدام خلايا تحتوي على المستقبل المراد قياس قوة الارتباطية فيه. 2- جزيء نموذج معروف قوة ارتباطيته بالمستقبل وقابل للإشعاع. 3- الجزيء نموذج مجهول قوة ارتباطه في المستقبل.
1- استخدام خلايا تحتوي على المستقبل المراد قياس قوة الارتباطية فيه. 2- جزيء نموذج معروف قوة ارتباطيته بالمستقبل وقابل للإشعاع. 3- الجزيء نموذج مجهول قوة ارتباطه في المستقبل.
طريقة العمل: يتم تحضين الخلايا من جسم الإنسان أو الحيوان المحتوية على المستقبل المراد قياس قوة الارتباط به مع مركب نموذجي معروف قوة ارتباطه بالمستقبل وقابل للإشعاع،وبإضافة الجزيء المجهول المراد قياس قوة ارتباطه تتم ازاحة المركب النموذجي القابل للإشعاع من المستقبل في الغشاء الخلوي
وبذلك ينخفض الاشعاع في الغشاء الخلوي الذي يدل على ازدياد في قوة الارتباط. ويمكن قياس ذلك ب فصل الغشاء الخلوي عن بقية مكونات الخلية وقياس كمية الاشعاعات عندما يتفاعل Radioligand مع Liquid Scintillation Cocktails لتعطي أطياف بدرجات مختلفة، وبقوة الاشعاع يتم معرفة الكمية المزاحة
لتفادي مشكلة الارتباط الغير محدد لأجزاء أخرى عن المستقبل في الخلية. يتم قياس الارتباط الغير محدد الذي يحدث لمستقبلات أخرى أو على غشاء الخلية نفسه عن طريق إضافة جزيء ثالث بكميات كبيرة في وجود الجزيء المشع المعروفة قوة ارتباطه ويربطان في نفس المستقبل
ويتم قياس كمية الاشعاع الصادرة من الغشاء التي تحدد كمية الارتباط الغير اختياري. ومن خلال طرح كمية الارتباط الكامل من الارتباط الغير محدد يتم معرفة الارتباط المحدد
Total) specific & nonspecific) binding- nonspecific binding = specific binding
Total) specific & nonspecific) binding- nonspecific binding = specific binding
اختبار حركية الكالسيوم لقياس potency لمثبط لمستقبل معين على مستوى الخلايا1: تحرير الكالسيوم في السيتوبلازم يدل على تفعيل أنواع معينة من المستقبلات. منها مستقبل الاوركسين 2 الذي بتفعيله يزيد كمية الكالسيوم داخل الخلية ولذلك طريقة قياس فاعلية اقونست أو مثبط تكون بعدة طرق منها:
3 عناصر أساسية في هذا الاختبار 1- الخلايا التي تحتوي على المستقبلات المراد قياس potency لها. 2- المحفز (Agonist) المعروف قدرته على تفعيل المستقبل وتحرير الكالسيوم داخل الخلايا. 3- المثبط (Antagonist) المراد قياس قدرته على تثبيط نفس المستقبل
زراعة الخلايا ثم احتضانها مع المثبط بدرجات مختلفة ثم اضافة المحفز ومعرفة قدرته على تفعيل حركة الكالسيوم التي هي جزء من تفاعلات المستقبل، مع ملاحظة أن هذا الاختبار ممكن أن يعمل لقياس فعالية المحفز أو المثبط أو أي مركب يغير من فعالية بروتين بنفس الطريقة مع تغير في آلية عمل الاختبار
جاري تحميل الاقتراحات...