بعد عملية PCR لغرض amplification of your desires gene،
ظهرت عندك النتيجة على شكل ظهور أكثر من باند (bands)…! مما يعني بأن النتيجة غير دقيقه👎🏻
هُنا راح أذكر أحد التقنيات المستخدمة مع ذكر بعض النقاط التي تخص هذه التقنية في سبيل الحصول على نتيجة أكثر دقة 👌🏻باذن الله ✨
ظهرت عندك النتيجة على شكل ظهور أكثر من باند (bands)…! مما يعني بأن النتيجة غير دقيقه👎🏻
هُنا راح أذكر أحد التقنيات المستخدمة مع ذكر بعض النقاط التي تخص هذه التقنية في سبيل الحصول على نتيجة أكثر دقة 👌🏻باذن الله ✨
من أحد أشهر التقنيات المستخدمة في مثل هذه الحاله السابقة و في تجارب استنساخ DNA fragments قبل عملية ligation هي تقنية
🔴DNA Gel Extraction
🔴DNA Gel Extraction
تحتاج تقنية DNA Gel Extraction:
🔺 إجراء gel electrophoresis للـجين المرغوب، يُفضل هنا وقت إجراء الجل في أستخدام gel comb عريض لتسهيل عملية الفصل، وإستخدام lower voltage وقت العملية، بالإضافة يُفضل بأن تكون نسبة الجل 0.8% حتى لاتكون عندك كمية جل كبيره وقت الفصل.
🔺 إجراء gel electrophoresis للـجين المرغوب، يُفضل هنا وقت إجراء الجل في أستخدام gel comb عريض لتسهيل عملية الفصل، وإستخدام lower voltage وقت العملية، بالإضافة يُفضل بأن تكون نسبة الجل 0.8% حتى لاتكون عندك كمية جل كبيره وقت الفصل.
🔺 الخطوة الثانية هي قطع الباند المطلوب بعد التعرف عليه بشكل دقيق جداً (عادةً تُجرى العملية تحت UV lamp) باستخدام مشرط خاص حاد ومعقم، يُفضل تجنب التعرض الطويل للـ UV عشان نتفادى DNA damage 👌🏻
🔺إذابة الباند الذي تم قطعة في buffer ( يجب مراعاة كمية المذيب المستخدم مع حجم الباند المفصول من الجل) تحت درجة حرارة عالية🌡
🔺ثم نقل العينة بإستخدام column عشان يساعد على ارتباط DNA
🔺 wash
🔺 Elute Your DNA With Elution Buffer
🔺 wash
🔺 Elute Your DNA With Elution Buffer
🔺أخر خطوة ماننسى نعمل gel electrophoresis أخير كاخطوة تأكيدية لمدى نقاوة الفصل المسبق ✨
جاري تحميل الاقتراحات...