يلعب الناقل دور مهم جداً في عملية الاستنساخ الجزيئي وتقنية الهندسة الوراثيه، plasmid هو جزيء DNA يستخدم كوسيلة لنقل المواد الوراثية الخارجية إلى خلية أخرى.هنا راح أتكلم عن البلازميد بشكل يساعد على فهم أعمق لعملية الاستنساخ الجزيئي مما يساعد باذن الله على نجاح هذه العملية👍🏻
بداية البلازميد هو DNA دائري صغير يمكن أن يتكاثر بشكل مستقل عن DNA الكروموسومي داخل الخلية. يُستخدم في المختبر لإدخال الحمض النووي ذي الأهمية في الخلية المضيفة وبالتالي يتكاثر بشكل مستقل.
يمكن أن يعمل الناقل في الوقت نفسه كعنصر تحكم للتعبير وإفراز وتنقية الأجسام المضادة أو His-tagged proteins.
بعض الامثلة للبلازميد المستخدمة 👇🏻
من أحد أهم خصائص البلازميد هو أن غالب البلازميدات التي تستخدم لتوصيل الحمض النووي تحتوي على جينات لمقاومة المضادات الحيوية. و بمجرد معالجة البكتيريا بالبلازميد ، ومن ثم تنميتها في وجود مضاد حيوي. هذا يساعد فقط على تواجد ونمو الخلايا التي تحتوي على هذا البلازميد.
أهم المكونات:
١-Antibiotic resistance gene👆🏻
٢-Origin of replication (replicon): يشير إلى الموقع المحدد الذي يبدأ فيه النسخ المتماثل
٣-MCS multiple cloning sites سلسلة قصيرة من الحمض النووي تتكون من عدد قليل من المواقع التى نستطيع قطعها ومن ثم يُسمح بإدخال الحمض النووي بسهولة
١-Antibiotic resistance gene👆🏻
٢-Origin of replication (replicon): يشير إلى الموقع المحدد الذي يبدأ فيه النسخ المتماثل
٣-MCS multiple cloning sites سلسلة قصيرة من الحمض النووي تتكون من عدد قليل من المواقع التى نستطيع قطعها ومن ثم يُسمح بإدخال الحمض النووي بسهولة
تصنيف البلازميد يكون على حسب الهدف المرغوب تحقيقه مثال:
Col plasmids: تحتوي هذه البلازميدات على جينات ترميز البكتيريا والبروتينات التي يمكن أن تقتل البكتيريا الأخرى.
Col plasmids: تحتوي هذه البلازميدات على جينات ترميز البكتيريا والبروتينات التي يمكن أن تقتل البكتيريا الأخرى.
F-plasmid: are capable of conjugation resulting in the expression of sex pill
Resistance plasmids: تحتوي هذه البلازميدات على جينات توفر مقاومة ضد المضادات الحيوية أو السموم.
Virulence plasmids: التي تحول البكتيريا إلى ممرض.
Degradative plasmids: التي تمكن من هضم المواد غير العادية
Degradative plasmids: التي تمكن من هضم المواد غير العادية
عملية استخلاص البلازميد في المختبرات في الوقت الحالي جداً بسيطة تتم عن طريق زراعه البكتيريا المحتوية على البلازميد مع إضافه المضاد الحيوي المناسب في وسط سائل ومن ثم إستخلاص البلازميد عن طريق إستخدام kit.
وكـخطوة للتاكد من إستخلاص البلازميد بشكل صحيح يـفضل عمل gel electrophoresis للبلازميد مع إستخدام ladder المناسب
مثال 👈🏻supercoiled DNA ladder
مثال 👈🏻supercoiled DNA ladder
وماننسى كخطوة اخيرة حفظ البلازميد المستخلص في -20°✨
جاري تحميل الاقتراحات...