?ثريد? عن immunoassays لفيروس الكورونا المستجد .
١- مقدمه/
ماهو immunoassays ؟
هي الاختبارات التي تكشف او تعد ( بروتينات ، الانتجينات او الأجسام المضادة التي تنتجها الاستجابة المناعية ضد مسببات الأمراض من العينات السريرية .
تُعرف immunoassay المستخدمة للكشف عن الأجسام المضادة أيضًا بالامصال أو الاختبارات المصلية.
ماهو immunoassays ؟
هي الاختبارات التي تكشف او تعد ( بروتينات ، الانتجينات او الأجسام المضادة التي تنتجها الاستجابة المناعية ضد مسببات الأمراض من العينات السريرية .
تُعرف immunoassay المستخدمة للكشف عن الأجسام المضادة أيضًا بالامصال أو الاختبارات المصلية.
٢- immunoassay تعتمد جميع
على ربط جسم مضاد بمستضد ( الانتجين)، والقدرة على إنتاج إشارة قابلة للقياس استجابة للربط ، إما عن طريق ربط الأجسام المضادة كيميائياً أو المستضدات مع نوع من العلامات القابلة للكشف. .يتبع
على ربط جسم مضاد بمستضد ( الانتجين)، والقدرة على إنتاج إشارة قابلة للقياس استجابة للربط ، إما عن طريق ربط الأجسام المضادة كيميائياً أو المستضدات مع نوع من العلامات القابلة للكشف. .يتبع
مجموعة متنوعة من التسميات المختلفة وطرق الكشف ممكنة. يتم الكشف في كثير من الأحيان من خلال انبعاث الإشعاع ، والتنبؤ بتغير اللون في المحلول ، أو الفلورة.
٣- أهداف immunoassay لـ SARS-CoV-2
تقوم اختبارات المستضد ( الانتجين ) لـ SARS-CoV-2 بالكشف عن و / أو تحديد كمية nucleocapsid (N) أو ارتفاع بروتينات (S) من الفيروس.
تكشف اختبارات الأجسام المضادة عن الأجسام المضادة (IgG أو IgM أو IgA) المنتجة ضد البروتينات الفيروسية N أو S.
تقوم اختبارات المستضد ( الانتجين ) لـ SARS-CoV-2 بالكشف عن و / أو تحديد كمية nucleocapsid (N) أو ارتفاع بروتينات (S) من الفيروس.
تكشف اختبارات الأجسام المضادة عن الأجسام المضادة (IgG أو IgM أو IgA) المنتجة ضد البروتينات الفيروسية N أو S.
في SARS-CoV-2 ، تظهر الأدلة المنشورة أن الحمل الفيروسي viral loads يبلغ ذروته في 3-5 أيام وأن كلا من IgM وIgG يبدأان في الزيادة بعد حوالي 10 أيام من ظهور الأعراض.ينتج معظم المرضى أجسامًا مضادة استجابة للفيروس(المعروف باسم التحول المصلي seroconversion )خلال الأسابيع الثلاثة الأولى
٤-أنواع immunoassays لفيروس SARS-CoV-2
الأنواع الأكثر شيوعًا immunoassays التي تم تطويرها لـ COVID-19 هي إما enzyme-linked immunosorbent assays مقايسة الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISAs) أو lateral flow immunoassays المقايسات المناعية للتدفق الجانبي (LFIs) ...يتبع
الأنواع الأكثر شيوعًا immunoassays التي تم تطويرها لـ COVID-19 هي إما enzyme-linked immunosorbent assays مقايسة الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISAs) أو lateral flow immunoassays المقايسات المناعية للتدفق الجانبي (LFIs) ...يتبع
والمعروفة أيضًا باسم اختبارات التشخيص السريع rapid diagnostic tests (RDTs) .
٥- ELISAs الاليزا هي واحدة من أكثر أنواع الفحص المناعي استخدامًا. تعتمد ELISAs على الأجسام المضادة Absأو المستضداتAgs المتصلة بسطح صلب للكشف عن الانتجين أو الجسم المضاد في العينة باستخدام تفاعل محدد للغاية للأجسام المضادة -للمستضد ...يتبع
تتم إضافة substrate لإنتاج إما تغيير اللون أو إشارة الضوء المرتبطة بكمية المستضد / الجسم المضاد الموجود في العينة الأصلية.
٦- بعض الميزات الرئيسية لـ ELISAs هي أنها:
* اختبار قائم على المختبر
* طلب أجهزة مخصصة (مثل plate readers ) وموظفي مختبر مُدربَين .
* يمكن استخدام مجموعات الكواشف( الكتات) التجارية أو البروتوكولات الداخلية ..يتبع
* اختبار قائم على المختبر
* طلب أجهزة مخصصة (مثل plate readers ) وموظفي مختبر مُدربَين .
* يمكن استخدام مجموعات الكواشف( الكتات) التجارية أو البروتوكولات الداخلية ..يتبع
* ذات إنتاجية عالية - تعمل على 96 أو 324 well plates
* يمكن إجراؤها من أنواع عينات مختلفة ، وهي البلازما أو المصل
* تأخذ ساعة ونصف للحصول على نتائج و
* حساسة للغاية.
غداً ان شاء الله نكمل بجدول يصف الأنواع الرئيسية من اختبارات ELISA ، ويوضح مزايا وعيوب كل نوع ... انتظرونا
* يمكن إجراؤها من أنواع عينات مختلفة ، وهي البلازما أو المصل
* تأخذ ساعة ونصف للحصول على نتائج و
* حساسة للغاية.
غداً ان شاء الله نكمل بجدول يصف الأنواع الرئيسية من اختبارات ELISA ، ويوضح مزايا وعيوب كل نوع ... انتظرونا
نستكمل ماتوقفنا معكم فيه بالأمس بهذا الجدول الذي يوضح انواع الاليزا وطريقة عملها ومميزات وعيوب كل نوع ??
والآن نستعرض معكم فيديوهات توضيحيه لطريقة عمل الأنواع المختلفه من الاليزا
١- فيديو توضيحي لعمل الاليزا بطريقة
( Direct -indirect-sandwich )
m.youtube.com
١- فيديو توضيحي لعمل الاليزا بطريقة
( Direct -indirect-sandwich )
m.youtube.com
٢- فيديو توضيحي لعمل الاليزا بطريقة competitive
m.youtube.com
m.youtube.com
يجب تنفيذ جميع الإجراءات المعملية في منشأة باستخدام إجراءات معادلة لـ BSL-2 ، على أساس تقييم المخاطر ، ويتم إجراؤها من قبل موظفين مدربين. يجب أن تتم المعالجة الأولية للعينات من المرضى المشتبه في إصابتهم بعدوى COVID-19 ، بالإضافة إلى أي إجراءات مثل العمل على vortex ..يتبع
وغسل لوحة ELISA ، لابد ان تكون في كبائن السلامة البيولوجية منعا لحدوث اي تطاير للفيروس لاسمح الله والتعرض لعدوى.
٧- المقايسات المناعية للتدفق الجانبي (LFIs) ، والمعروفة أيضًا باسم اختبارات التشخيص السريع rapid diagnostic tests (RDTs) تسمح بالكشف السريع عن مستضدات أو أجسام مضادة لـ SARS-CoV-2 باستخدام شريط اختبار. عند إضافة عينة إلى شريط الاختبار ، ينتقل المستضد أو الجسم المضاد ...يتبع
إلى أعلى شريط الاختبار ، حيث يتم التقاطه بواسطة جسم مضاد للكشف. يمكن أن يرتبط الجسم المضاد للكشف بالجسيمات النانوية الذهبية أو الخرز اللاتكس . gold nanoparticles or latex beads
صوره توضيحيه كمثال لإختبار الكشف السريع ??
الميزات الرئيسية لـ RDTs تتضمن بعض ما يلي:
*يمكن إجراؤها في نقطة الرعاية point of care
* سهلة للاستخدام ، ولاتحتاج الى خبره تقنيه عاليه.
*تستخدم مرةواحدة ، مع أو بدون قارئ
*يمكن استخدامهاعلى أنواع عينات مختلفة: المسحةالبلعومية ،المصل،البلازما ،الدم الكامل ،والسوائل الأخرى ..يتبع
*يمكن إجراؤها في نقطة الرعاية point of care
* سهلة للاستخدام ، ولاتحتاج الى خبره تقنيه عاليه.
*تستخدم مرةواحدة ، مع أو بدون قارئ
*يمكن استخدامهاعلى أنواع عينات مختلفة: المسحةالبلعومية ،المصل،البلازما ،الدم الكامل ،والسوائل الأخرى ..يتبع
*وقت النتائج حوالي 10-30 دقيقة ؛ و
تستخدم الاختبارات التشخيصية السريعة نفس مبادئ ربط الأجسام المضادة للمستضد مثل ELISAs ولكنها بشكل عام أقل حساسية.
.
نستكمل معكم غداً ماتبقى من سلسلة التغريدات .
تستخدم الاختبارات التشخيصية السريعة نفس مبادئ ربط الأجسام المضادة للمستضد مثل ELISAs ولكنها بشكل عام أقل حساسية.
.
نستكمل معكم غداً ماتبقى من سلسلة التغريدات .
٧- الاستجابة المناعيه ضد الفيروس المسبب للكوفيد-١٩
يمكن لجهاز المناعة أن يشن استجابة واسعة ضد فيروس السارس- CoV -2 بما في ذلك كل من المناعة الخلوية والخلطية ( humoral)في الفيديو تلخيص سريع للاستجابة المناعية البشرية
عن طريق خلايا الجهاز المناعي
m.youtube.com
..يتبع
يمكن لجهاز المناعة أن يشن استجابة واسعة ضد فيروس السارس- CoV -2 بما في ذلك كل من المناعة الخلوية والخلطية ( humoral)في الفيديو تلخيص سريع للاستجابة المناعية البشرية
عن طريق خلايا الجهاز المناعي
m.youtube.com
..يتبع
عادةً ما تتضمن الاستجابة الطبيعية للأجسام المضادة استجابة أولية بواسطة الأجسام المضادة المناعية (IgM) ، والتي تظهر أولاً أثناء العدوى والانحدار الحاد ، يليها ...يتبع
ظهور الأجسام المضادة IgG وارتفاعها إلى مستوى عالٍ ومستدام. مع زيادة مستويات الأجسام المضادة ، يتم التخلص من جزيئات الفيروس وينخفض الحمل الفيروسي.
وكما هو موضح في الشكل ادناه ، نرى استجابة غير طبيعية للأجسام المضادة في مرض COVID-19 ، حيث يحدث التحول المصلي (أو التغيير من عدم اكتشاف الجسم المضاد إلى اكتشاف الأجسام المضادة لكل من IgM و IgG في نفس الوقت تقريبًا...يتبع
. يمكن أن تصبح الأجسام المضادة لـ IgM و IgG قابلة للكشف في وقت مبكر بعد ٤ أيام من ظهور الأعراض ، ومعظم المرضى يحصل عندهم التحول المصلي في اليوم 14. يمكن أن تستمر الأجسام المضادة لأسابيع بعد أن تهدأ الأعراض..يتبع
ومع ذلك ، فإن ظهور IgM و IgG لا يؤدي إلى إزالة سريعة للفيروس من الدم ، مما يجعل من الصعب مقارنة وجود IgM و IgG للتمييز بين العدوى المستمرة والماضية.
نكمل سلسلة التغريدات غداً باذن الله
نكمل سلسلة التغريدات غداً باذن الله
٨- انتيجينات فيروس الكورونا المستجد سارس -CoV -2
في هذه الصوره نوضح الانتيجينات للفيروس مع شرح عن كل نوع منها .
*البروتين الصاعد او المرتفع عن سطح الفيروس (S) هو أكثر بروتينات السارس CoV-2 تعرضاً ،والذي يرتبط بمستقبل معين على الخلايا البشرية ...يتبع
في هذه الصوره نوضح الانتيجينات للفيروس مع شرح عن كل نوع منها .
*البروتين الصاعد او المرتفع عن سطح الفيروس (S) هو أكثر بروتينات السارس CoV-2 تعرضاً ،والذي يرتبط بمستقبل معين على الخلايا البشرية ...يتبع
مما يسمح للفيروس بإصابة الخلية. يتكون بروتين S من الوحدات الفرعية S1 و S2.
- يبدو أن S1 هو المستضد الأكثر تغيرًا ، مما يجعله مرشحًا جيدًا للتمييز بين الفيروسات التاجية الأخرى (على سبيل المثال ، فيروس التاجي SARS التاجي ، SARS-CoV)..يتبع
- يبدو أن S1 هو المستضد الأكثر تغيرًا ، مما يجعله مرشحًا جيدًا للتمييز بين الفيروسات التاجية الأخرى (على سبيل المثال ، فيروس التاجي SARS التاجي ، SARS-CoV)..يتبع
ومع ذلك ، فإن الوحدة الفرعية S2 تشترك في التشابه في epitopes الأجسام المضادة (منطقة مستضد معترف به بواسطة جسم مضاد) مع S2 منSARS-CoV.
*
Nucleoprotein (N) هو أكثر بروتين فيروسي وفير يتم إنتاجه وإلقاءه أثناء الإصابة بسارس CoV-2. وهو المؤثر على المناعه ويمكن العثور عليها في الدم والبول
Nucleoprotein (N) هو أكثر بروتين فيروسي وفير يتم إنتاجه وإلقاءه أثناء الإصابة بسارس CoV-2. وهو المؤثر على المناعه ويمكن العثور عليها في الدم والبول
* بروتين الماتريكس (M) هو البروتين الأكثر وفرة داخل فيروس سارس - CoV - 2.
ولازال هناك كثير من المعلومات ونتطلع لمعرفة رغبتكم بخصوص الإكمال ونقدر طول السلسلة ونأمل ان تقدم لكم ولو بشئ بسيط ...تحياتي لكم جميعاً.
ولازال هناك كثير من المعلومات ونتطلع لمعرفة رغبتكم بخصوص الإكمال ونقدر طول السلسلة ونأمل ان تقدم لكم ولو بشئ بسيط ...تحياتي لكم جميعاً.
جاري تحميل الاقتراحات...