اليوم عندي موضوع عن DNA Sequencing " تسلسل الحمض النووي "
طبعا عندي طريقتين للكشف عن تسلسل الحمض النووي وهي
1- Maxam/Gilbert ( الطريقة الكيميائية)
2- Sanger ( المستخدمة في الاب)
بتكلم عن كل وحدة بالتفصيل :
طبعا عندي طريقتين للكشف عن تسلسل الحمض النووي وهي
1- Maxam/Gilbert ( الطريقة الكيميائية)
2- Sanger ( المستخدمة في الاب)
بتكلم عن كل وحدة بالتفصيل :
1- Maxam/Gilbert :
هي اول طريقة لكشف تتابع تسلسل المادة الوراثية، يتم فيها وضع المادة الوراثية في 4 تيوبس ومن ثم يضاف لكل تيوب مادة مخصصة لقاعدة النيتروجينية معينة حيث ترتبط مع القاعدة النيتروجينية ويحدث قطع للتسلسل
هي اول طريقة لكشف تتابع تسلسل المادة الوراثية، يتم فيها وضع المادة الوراثية في 4 تيوبس ومن ثم يضاف لكل تيوب مادة مخصصة لقاعدة النيتروجينية معينة حيث ترتبط مع القاعدة النيتروجينية ويحدث قطع للتسلسل
ويتم تقسيم التيوبس إلى (G ,G+A, C ,C+T) لإضافة المواد الخاصة بها
ومن ثم العينات على الجل كما هو موضحة بالصورة
ومن ثم العينات على الجل كما هو موضحة بالصورة
ثم وتتم قراءته من الاسفل للأعلى بحيث اول براند هو اول قاعده نيتروجينية في التسلسل وفي حال صادف براندين في مستوى واحد تستبعد القاعدة النيتروجينية المضافة الى الاخرى ( مثلاً براندين على مستوى واحد في G و G+A تستبعد القاعدة النيتروجينية A والعكس كذلك ) كما هو موضح في الفيديو
2- Sanger :
ولها عدة اسامي “ Chain Termination , Enzymatic method “
ويتم فيها وضع ٤ تيوبس كل تيوب يحتوي على برايمر و dNTPs و إنزيم DNA polymerase و المادة الوراثية لكن تختلف في ddNTPs بحيث كل قاعدة نيتروجينية لها ddNTPs خاص
ولها عدة اسامي “ Chain Termination , Enzymatic method “
ويتم فيها وضع ٤ تيوبس كل تيوب يحتوي على برايمر و dNTPs و إنزيم DNA polymerase و المادة الوراثية لكن تختلف في ddNTPs بحيث كل قاعدة نيتروجينية لها ddNTPs خاص
A = ddATP
C= ddCTP
G= ddGTP
T=ddTTP
و يستخدم لون مميز لـ ddNTPs الاربعة
ومن ثم وضع العينات على جل و قراءتها كما في الطريقة الكيميائية
C= ddCTP
G= ddGTP
T=ddTTP
و يستخدم لون مميز لـ ddNTPs الاربعة
ومن ثم وضع العينات على جل و قراءتها كما في الطريقة الكيميائية
او استخدام جهاز 3500 genetic analyzer وهو المستخدم في الابات حاليا بحيث يستخدم الكت الخاص بالجهاز على العينة يقوم بصبغ اطراف السلسلة المنقطعة عند قاعدة نيتروجينية و يتمص اللون عند طول موجي معين و تظهر على الحاسب الالي
جاري تحميل الاقتراحات...