الكروماتوغرافيا Chromatography
هي طريقة فيزيائية للتحليل والفصل باستخدام طورين وهي الوسط الثابت أو ما يسمى stationary phase و الوسط المتحرك mobile Phase ولكل منهما خصائصه التي تستخدم في عملية الفصل مثل : القطبية ، الادمصاص ، او التبادل الأيوني
هي طريقة فيزيائية للتحليل والفصل باستخدام طورين وهي الوسط الثابت أو ما يسمى stationary phase و الوسط المتحرك mobile Phase ولكل منهما خصائصه التي تستخدم في عملية الفصل مثل : القطبية ، الادمصاص ، او التبادل الأيوني
أنواع الكروماتوقرافي ?
* Column chromatography
* Ion-exchange chromatography
* Gel-permeation (molecular sieve) chromatography
* Affinity chromatography
* Paper chromatography
* Thin-layer chromatography
* Gas chromatography
* Column chromatography
* Ion-exchange chromatography
* Gel-permeation (molecular sieve) chromatography
* Affinity chromatography
* Paper chromatography
* Thin-layer chromatography
* Gas chromatography
* Dye-ligand chromatography
* Hydrophobic interaction chromatography
* Pseudoaffinity chromatography
* High-pressure liquid chromatography (HPLC)
Ref?
Separation techniques: Chromatography
ncbi.nlm.nih.gov
* Hydrophobic interaction chromatography
* Pseudoaffinity chromatography
* High-pressure liquid chromatography (HPLC)
Ref?
Separation techniques: Chromatography
ncbi.nlm.nih.gov
الكروماتوغرافيا العامودي Column Chromatography
تستخدم هذه التقنية لتنقية الجزيئات الحيوية. يكون العمود على شكل سحاحة مليئ بحبيات الالومينا او سيلكا جل بعد ذلك توضع المادة المراد فصلها على هيئة محلول مذاب ، يتم تجميع العينات في الجزء السفلي من الجهاز بطريقة تعتمد على الحجم
تستخدم هذه التقنية لتنقية الجزيئات الحيوية. يكون العمود على شكل سحاحة مليئ بحبيات الالومينا او سيلكا جل بعد ذلك توضع المادة المراد فصلها على هيئة محلول مذاب ، يتم تجميع العينات في الجزء السفلي من الجهاز بطريقة تعتمد على الحجم
الكروماتوغرافيا الورقية Paper chromatography
يكون الطور الثابت عبارة عن غشاء رقيق ممتز من الورق (السليلوز) والطور المتحرك سائل وهي ابسط أنواع التقنيات الكروماتوغرافي حيث توضع قطرة على حافة الورقة وتغمس حافة الورقة في الطور المتحرك (مذيب) يتبع ...
يكون الطور الثابت عبارة عن غشاء رقيق ممتز من الورق (السليلوز) والطور المتحرك سائل وهي ابسط أنواع التقنيات الكروماتوغرافي حيث توضع قطرة على حافة الورقة وتغمس حافة الورقة في الطور المتحرك (مذيب) يتبع ...
ويتم تشخيص المواد بعد فصلها على الورقة برشها بكواشف معينة ومن العوامل المؤثرة على الفصل في هذه الطريقة هي:
1️⃣ القوى الدافعة والتي تتمثل في سريان المذيب والذوبانية (ذوبان المادة في المذيب)
2️⃣ القوى المانعة وهي التي تعمل على إعاقة تحرك المواد وتتمثل في الامتزاز والتوزيع
1️⃣ القوى الدافعة والتي تتمثل في سريان المذيب والذوبانية (ذوبان المادة في المذيب)
2️⃣ القوى المانعة وهي التي تعمل على إعاقة تحرك المواد وتتمثل في الامتزاز والتوزيع
كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة Thin Layer Chromatography أو (TLC)
تتم عملية الفصل على طبقة رقيقة من مادة الوسط الثابت المطلية على الواح مصنوعة من الزجاج او البلاستك او الالمنيوم ويعتمد الفصل اما على ظاهرة الامتزاز او الاستبدال الايوني
تتم عملية الفصل على طبقة رقيقة من مادة الوسط الثابت المطلية على الواح مصنوعة من الزجاج او البلاستك او الالمنيوم ويعتمد الفصل اما على ظاهرة الامتزاز او الاستبدال الايوني
يعتبر هذا النوع من الكروماتوغرافيا مشابه للنوع السابق ولكن بدلاً من استخدام الورقة كوسط ثابت stationary phase يتم استخدام طبقة رقيقة من السيليكا أو الألومينا أو السليلوز على مادة خاملة ومسطحة (البلاستيك أو الزجاج)
كروماتوغرافيا التبادل الأيوني Ion exchange chromatography
يستخدم لفصل المركبات المشحونة وهو أكثر فعالية في فصل الجزيئات الضخمة مثل الأحماض النووية والبروتينات .
يستخدم لفصل المركبات المشحونة وهو أكثر فعالية في فصل الجزيئات الضخمة مثل الأحماض النووية والبروتينات .
كروماتوغرافيا الغازات Gas Chromatography
تشبه تقنية HPLC ولكن الفرق هو انه خزانات المذيبات تحتوى على غازات خاملة مثل النيتروجين أو الهيليوم (في الوسط المتحرك)يتم التحكم فى درجة حرارته وفق المعايير العالمية لكل مادة ويجب مراعاة ثبات سرعة سريان الغاز فى هذه التقنية
تشبه تقنية HPLC ولكن الفرق هو انه خزانات المذيبات تحتوى على غازات خاملة مثل النيتروجين أو الهيليوم (في الوسط المتحرك)يتم التحكم فى درجة حرارته وفق المعايير العالمية لكل مادة ويجب مراعاة ثبات سرعة سريان الغاز فى هذه التقنية
هنا ملف مبسط شرح نظري وعملي على جهاز GC ?
faculty.sdmiramar.edu
faculty.sdmiramar.edu
كروماتوغرافيا السوائل High Performance Liquid Chromatography أو (HPLC)
تعتمد هذه التقنية لتحديد هوية المركبات و السوائل ذات درجات غليان عالية ، تعتمد آلية الفصل على درجة التوزع المحلول الحاوي على المركب المدروس بين الطور الحامل mobile Phase والطور الثابت
تعتمد هذه التقنية لتحديد هوية المركبات و السوائل ذات درجات غليان عالية ، تعتمد آلية الفصل على درجة التوزع المحلول الحاوي على المركب المدروس بين الطور الحامل mobile Phase والطور الثابت
في هذه التقنية يتم التحكم فى سرعة سريان السائل ودرجة الحرارة وفق المعايير العالمية لكل مادة يراد فصلها ومعرفة نسب مكوناتها، ومن هنا يتم معرفة المواد المكونة للخليط عن طريق معرفة الوقت الذى انفصلت فيه كل مادة ومن ثمَّ مقارنة هذا الوقت مع القياسات العالمية التى تعد كمرجع لذلك
شكل تخطيطي لجهاز HPLC ⬇️
(1) خزانات المذيب (2) مذيب لإزالة الشحوم والشوائب (3) صمام التدرج (4) وعاء لخلط السوائل معاً (5) مضخة للضغط العالي (6-أ) صمام لتبديل موقع الإدخال (6-ب) صمام تبديل لوضع التحميل (7) حلقة حقن العينة
(1) خزانات المذيب (2) مذيب لإزالة الشحوم والشوائب (3) صمام التدرج (4) وعاء لخلط السوائل معاً (5) مضخة للضغط العالي (6-أ) صمام لتبديل موقع الإدخال (6-ب) صمام تبديل لوضع التحميل (7) حلقة حقن العينة
(8) العمود المبدئي (عمود التخليص من الشوائب التى قد تضر بالعمود الرئيسى) (9) عمود التحليل الرئيسى حيث تتم عملة الفصل بداخله (10) كاشف لمعرفة المكونات المنفصلة (11) جمع البيانات (12) جمع النفايات الخارجة.
مرحلة كروماتوقرام The chromatogram:
هنا يتم رسم العلاقة بين زمن المكوث للمواد المختلفة التي تم فصلها في العمود مع الاستجابة والنتيجة تكون على شكل مايسمى كروماتوقرام
Retention Time =يعني الزمن الذي تقضيه مادة معينة داخل العمود من لحظة حقنها حتى خروجها بزمن المكوث
هنا يتم رسم العلاقة بين زمن المكوث للمواد المختلفة التي تم فصلها في العمود مع الاستجابة والنتيجة تكون على شكل مايسمى كروماتوقرام
Retention Time =يعني الزمن الذي تقضيه مادة معينة داخل العمود من لحظة حقنها حتى خروجها بزمن المكوث
?ماهي العوامل مؤثر على زمن الاستبقاء Retention Time ?
معدل جريان الطور المتحرك ، نوع الطور الثابت ، التداخلات بين الطور الثابت والمادة المراد فصلها ، درجة حرارة العمود ، طول العمود ، نوع الطور المتحرك .
معدل جريان الطور المتحرك ، نوع الطور الثابت ، التداخلات بين الطور الثابت والمادة المراد فصلها ، درجة حرارة العمود ، طول العمود ، نوع الطور المتحرك .
?ماهي تطبيقات الكروماتوغرافيا:
مجال الأدوية فعن طريقها يمكن :
1-تحديد كل مكون من مكونات الادويه المنتجه حديثا لمعرفة مدى صلاحياتها عن طريق تحديد نسبة الشوائب فيها
مجال الأدوية فعن طريقها يمكن :
1-تحديد كل مكون من مكونات الادويه المنتجه حديثا لمعرفة مدى صلاحياتها عن طريق تحديد نسبة الشوائب فيها
2 - كما يمكن الكشف على المواد الخام المستورده لمعرفه كفائتها ونسبه الشوائب بها لضبط التركيزات المستخدمة في صناعة الأقراص الدوائية
3 -تحديد مدى تأثير الظروف المختلفه من الضغط والحرارة على مكونات الدواء لمعرفة تاريخ الأنتهاء وبعد إجراء هذه الأختبارات يتم حقن الماده مره أخرى بجهاز GC أو HPLC بعد الإستخلاص للتأكد من مدي التغير في التركيز نتيجه تأثير الضغط ودرجة الحراره ومن هنا يتم تحديد تاريخ إنتهاء الدواء
في مجال التحاليل الطبية :
الكثير يظن أن التحاليل الطبية بعيد عن مجال الكروماتوجرافيا فلذلك يلزم التنويه ان أساس المجال مبني على الفصل:
عند أخذ عينه من الدم فقبل البدء في أي أختبار لكيمياء الدم أو الهرمونات يلزم الفصل المبدئي لعينه عن طريق ال Centrifuge وهذا يعد فصل فيزيائي
الكثير يظن أن التحاليل الطبية بعيد عن مجال الكروماتوجرافيا فلذلك يلزم التنويه ان أساس المجال مبني على الفصل:
عند أخذ عينه من الدم فقبل البدء في أي أختبار لكيمياء الدم أو الهرمونات يلزم الفصل المبدئي لعينه عن طريق ال Centrifuge وهذا يعد فصل فيزيائي
عند البدء في الأختبارات نفسها لابد من فصل كل مكون من مكونات الدم بواسطه كواشف معينه علي حسب الأختبار المطلوب فمثلا :
تحديد ومعرفة نسبة الكحول في الدم يمكن ان يتم الاختبار بواسطة جهاز الكروماتوجراف الغازي السريع
تحديد ومعرفة نسبة الكحول في الدم يمكن ان يتم الاختبار بواسطة جهاز الكروماتوجراف الغازي السريع
مجال الطب الشرعي والسموم يفيد ذلك فى التحقيقات الجنائية فعن طريق تحليل الدم والملابس والأطعمة نتمكن من معرفة وجود مواد سامة أو كحولات أو مخدرات فى الدم أو الأطعمة والمشروبات الموجودة بمسرح الجريمة ، في مجال الكشف عن التزوير والتزييف للمستندات ( توجد تقنيات حديثة لها )
جاري تحميل الاقتراحات...