Abbas AlZubaidi
Abbas AlZubaidi

@biomedical79

11 تغريدة 9 قراءة Apr 01, 2020
?سلسلة تغريدات حول الجهاز المعلن عنه من قبل شركة ابوت! يعمل على تقنية ابسط من تقنية ال real-time PCR وهي ما يعرف ب Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) اي دورات التكبير الجيني ذو الحرارة المتناظرة ويستخدم دورة واحدة فقط او دورتان للكشف بدرجة حرارة تصل الى 50-65 مئوية!
⬅️في تقنية LAMP ، يتم تضخيم التسلسل المستهدف للجينات الخاصة بالمسبب المرضي (pathogens) عند درجة حرارة ثابتة تتراوح من 50 إلى 65 درجة مئوية باستخدام مجموعتين أو ثلاث مجموعات من البادئات البروتينية و انزيم البوليميرز مع نشاط إزاحة عالٍ بالإضافة إلى نشاط النسخ المتوالي للجينات.
⬅️يتم عادة استخدام 4 بادئات primers مختلفة لتضخيم 6 مناطق متميزة على الجين المستهدف للمسبب المرضي ، مما يزيد من الخصوصية في النتائج ولكن على حساب الدقة. زوج إضافي من "بادئات حلقية" يمكن أن يزيد من سرعة التفاعل. كمية الحمض النووي المنتجة في LAMP أعلى بكثير من التضخيم القائم ع PCR
⬅️يمكن الكشف عن منتج التضخيم الجيني عن طريق القياس الضوئي optical measurement ، وقياس التعكر الناجم عن رواسب بيروفوسفات المغنيسيوم في المحلول كمنتج ثانوي للتضخيم. وهذا يسمح بسهولة كشف التفاعل بالعين المجردة أو من خلال طرق الكشف الضوئية البسيطة للأحجام الصغيرة للمحلول التجريبي!
⬅️يمكن أن يتبع التفاعل في الوقت الحقيقي إما عن طريق قياس العكرة أو عن طريق استخدام الأصباغ المتقاربة مثل SYTO9. يمكن استخدام الأصباغ ،مثل SYBR الأخضر ، لإنشاء تغيير لوني مرئي يمكن رؤيته بالعين المجردة دون الحاجة إلى معدات باهظة الثمن،أو لاستجابة يمكن قياسها بدقة أكبر بالأجهزة.
⬅️تقوم جزيئات الصبغة المضافة بتقريب أو تسمية الحمض النووي للمسبب المرضي بصورة مباشرة ، وبالتالي يمكن ربطها بعدد النسخ الموجودة في بداية التفاعل مما يعطي نتيجة فحص دقيقة. وبالتالي ، يمكن أن يكون LAMP كميًا أيضًا.
⬅️من الممكن الكشف في الأنبوب الأختباري عن تضخيم الحمض النووي LAMP باستخدام الكالسين المحمل من المنغنيز الذي يبدأ تفاعل الفلورة عند تعقيد المنغنيز بواسطة بيروفوسفات أثناء تخليق الحمض النووي في المختبر او تحت ظروف مختبرية.
⬅️هناك طريقة أخرى للكشف البصري عن LAMP بالعين المجردة تعتمد على قدرتها على التهجين مع انزيم DNAss التكميلي المرتبطة بالذهب وبالتالي منع تغير اللون الأحمر إلى اللون البنفسجي والأزرق الذي يمكن أن يحدث أثناء التجميع الناجم لجزيئات الذهب وفصلها عن الملح.
⬅️لذلك ،يمكن أن تكون طريقة LAMP مقترنة بالكشف عن المسببات المرضية بواسطة AuNP بمزايا مهمة على الطرق الأخرى من حيث تقليل وقت الفحص، وتأكيد amplicon عن طريق التهجين واستخدام معدات أبسط (كمثال:لا حاجة إلى المعالج الحراري ،معدات GEP أو اضاءة الأشعة فوق البنفسجية) لأكمال الفحص!
⬅️قد يكون جهاز ID-Now احد الحلول الاساسية في الكشف السريري الاولي لحالات COVID19 ولكن لكي يكون دقيقاً بشكل كامل يحتاج معايرة لكل السلالات التي ستتطور من الفيروس التاجي المصدري! وهنا يجب على الشركة اصدار محاليل داعمة للتحليلات المستقبلية وتجنب ال false negatives في الفحوصات!
⬅️أضافة الى ان الجهاز مصمم للكشف الاولي Early viral RNA detection فقط عن سلسلة الامراض الخاصة والمبرمجة من خلال كتات فحص تصنعها الشركة فقط! (اي ان المسألة ستصبح احتكارية بحتة)! ولكن تدريبه سهل! ولذلك يجب على الشركة تقليل الثمن بشكل يسمح باستخدامه لكل الدول ويسهل الوصول للجميع

جاري تحميل الاقتراحات...