صباح الخير جميعاً اليوم ان شاء الله راح اشاركم بالاشياء اللي اتعلمتها والخبره الي اكتسبتها في مختبر الهيستوباثولوجي كطالبة امتياز (كيف نسوي embedding, trimming, sectioning) للعينات بطريقه مبسطة 🔬✨
في بدايه اليوم راح نستلم كل العينات ونتاكد انه ندخلها في السيستم ونطبع ستيكرز فيها باركود يرمز لكل مريض ونعبي الاوراق اليوميه الي تتضمن تفاصيل عينات المرضى 📋
(خطوه روتينيه ولكن مهمه جداً) ☝🏼
(خطوه روتينيه ولكن مهمه جداً) ☝🏼
بعد مايجي الدكتور المختص ويحدد الانسجة او الاجزاء الي راح نشتغلها، نحطها في كاسيتات بلاستيكية ونحضر العينات لعمليه الfixation وهي تحضير العينات لغمرها بشمع البارافين 😮✨
طيب نرجع للكاسيتات ، لها الوان وكل لون يرمز لنوع معين من العينات🤔
(ولكن الشي هذا يرجع لنظام المستشفى نفسها كل مستشفى له نظام الوان معين لذلك اتأكدوا من المستشفى الي تطبقون فيه) 🎨
(ولكن الشي هذا يرجع لنظام المستشفى نفسها كل مستشفى له نظام الوان معين لذلك اتأكدوا من المستشفى الي تطبقون فيه) 🎨
المستشفى الي طبقت فيه كان يتبع الاتي:
Green :bone marrow biopsy
Yellow: small biopsy
Orange :lung or kidney
White: the rest of tissues
Green :bone marrow biopsy
Yellow: small biopsy
Orange :lung or kidney
White: the rest of tissues
الFixation
راح ندخل كاستات العينات في جهاز ويبداء عمليه الفكسيشن بإستخدام الفورمالين و تراكيز متصاعده من الكحول لاخراج كل ذرات الماء الموجوده في النسيج
ومن ثم الزايلين وننتهي بشمع البارافين نفسه. 😲✨
عند انتهاء هذي الخطوه الانسجه راح تكون جاهزه لغمرها في قوالب شمع البارافين.
راح ندخل كاستات العينات في جهاز ويبداء عمليه الفكسيشن بإستخدام الفورمالين و تراكيز متصاعده من الكحول لاخراج كل ذرات الماء الموجوده في النسيج
ومن ثم الزايلين وننتهي بشمع البارافين نفسه. 😲✨
عند انتهاء هذي الخطوه الانسجه راح تكون جاهزه لغمرها في قوالب شمع البارافين.
في البدايه لازم نتأكد انه حجم القالب المعدني يتناسب مع حجم العينه مايكون كبير زياده عن اللزوم وولا صغير زياده عن اللزوم
طيب يلا نتعرف على جهاز الEmbedding
الجهاز يحتوي على سطح دافئ مائل للسخونه للمحافظة على ذائبية البارافين خلال تثبيت العينه في الموقع المناسب وازاله الشمع اللزج عن الملاقط🔥
ويحتوي على سطحين بارده واحد جداً صغير وامام الانبوب الي ينزل منه شمع البارافين مباشره❄️🚰
طيب ليش ؟ 🤔
الجهاز يحتوي على سطح دافئ مائل للسخونه للمحافظة على ذائبية البارافين خلال تثبيت العينه في الموقع المناسب وازاله الشمع اللزج عن الملاقط🔥
ويحتوي على سطحين بارده واحد جداً صغير وامام الانبوب الي ينزل منه شمع البارافين مباشره❄️🚰
طيب ليش ؟ 🤔
الهدف من السطح البارد الصغير تجميد قاع القالب الحديدي الي يحتوي العينه والشمع لتثبيت العينه في مكانها لانها راح تجلس تتحرك ويتغير مكانها لو ما اتثبتت كويس😅وخلال الخطوه هذي راح نحتاج نستعين بملاقط حديدية وفي حال لاحظنا انه الملقط صار لزج نحطه على السطح الدافئ ونستخدم غيره☝🏼
لازم لازم لازم نتأكد انه:
📍 العينه تم تثبيتها على الاسطح الصحيحه او الاتجاه الصحيح.
📍لو كانت اجزاء صغيره نصبت اكبر جزء اولاً في المنتصف بعدين نبداء بتثبيت بقيه الاجزاء بناءً على الحجم ونحرص انها تكون متقاربه باستخدام السطح البارد الصغير.
📍 العينه تم تثبيتها على الاسطح الصحيحه او الاتجاه الصحيح.
📍لو كانت اجزاء صغيره نصبت اكبر جزء اولاً في المنتصف بعدين نبداء بتثبيت بقيه الاجزاء بناءً على الحجم ونحرص انها تكون متقاربه باستخدام السطح البارد الصغير.
📍لو كانت العينه تحتوي جزء كبيره واجزاء صغيره في البدايه نثبت الكبير، بعدين نحاول نجمعها بالقرب من الجزء الكبير ونكبسها بمكبس معدني مع ثبيتها.
📍احياناً من شدة ما العينة صغيره تكون داخل كيس بلاستيك داخل الكاسيت نفسه ولم نبغا نشتغل العينه افضل طريقه نتعبها عشان ماتضيع او تضرر بما انها صغيره جداً هو نحاول نفرد الكيس على السطح الدافئء بحيث يذوب كل الشمع الي فيه وييصير مسطح بشكل يسمحلنا باخذ العينه بسهوله 🤝
نرجع لموضوع الكبس 🌞🔨
بعد تثبيت العينه على السطح البارد الصغير راح نستعين بأداه حديدية مسطحه ونضغط على العينه الي داخل الشمع
والهدف من هذي الخطوه هو جعل سطح العينه متساوي وقت تقطيعها بدون وجود اي فراغات.
بعد تثبيت العينه على السطح البارد الصغير راح نستعين بأداه حديدية مسطحه ونضغط على العينه الي داخل الشمع
والهدف من هذي الخطوه هو جعل سطح العينه متساوي وقت تقطيعها بدون وجود اي فراغات.
بعد الخطوه هذي راح نضيف سطح الكاسيت للقالب المعدني ونصُب عليه المزيد من الشمع لتثبيته 🚰
وننقله على السطح البارد الكبير عشان يتجمد البلوك بشكل كامل لكده بين ال٥-١٠ دقايق❄️ كيف نتاكد انه اتجمد بالكامل؟اذا جيتم تفكونه من القالب المعدني راح يخرج بسهوله كبيره وصعب اخراجه اذا ماجمد
وننقله على السطح البارد الكبير عشان يتجمد البلوك بشكل كامل لكده بين ال٥-١٠ دقايق❄️ كيف نتاكد انه اتجمد بالكامل؟اذا جيتم تفكونه من القالب المعدني راح يخرج بسهوله كبيره وصعب اخراجه اذا ماجمد
بعد مانفك بلوكات العينات من القوالب المعدنيه نبداء مرحله تقشير الشمع الزائد من اطراف سطح الكاسيت (الخطوه هذي اشبه بتقشير البطاطس😂🤝)
طيب ليش ؟ لوكان فيه واكس زائد حتى لو كميه بسيطة ماراح يكون ثابت وراح يتزحلق البلوك في منتصف عمليه الtrimming او sectioning
😶
😶
قبل مانبداء تقطيع في العينه لازم نتأكد من المايكروتوم بالاول هل تم تثبيته بالقياسات المناسبه للشخص الي راح يستخدمه ؟ وفيه بعض المايكروتومز تكون شبه آلية وفيها ازارير ولكل ازرار استخدام معين بقياس معين وطبعاً يختلف نوع الجهاز بين المستشفيات فالافضل تتدرب على الجهاز المتوافر عندك
بالاضافه لنقطه ثانيه وهي نظافه المكان 🤝
الفريق الي دربني علمني افرد مناديل تحت موقت تثبيت البلوك مباشره و في المساحه الي بين المايكروتوم وبين الشخص الي يستخدمه.
والشي هذا يساعد بسهوله ازاله بقايا الشمع وتنظيف المكان في ثواني 👌🏼✨
الفريق الي دربني علمني افرد مناديل تحت موقت تثبيت البلوك مباشره و في المساحه الي بين المايكروتوم وبين الشخص الي يستخدمه.
والشي هذا يساعد بسهوله ازاله بقايا الشمع وتنظيف المكان في ثواني 👌🏼✨
ونعود لاكثر مرحله ممتعه وهي التقطيع 😈🔪
اهم عامل مشترك بين ال
Trimming & sectioning
لازم البلوكات تكون بارده قدر الامكان لانه في النهايه احنا نتعامل مع شمع كل ماكان بارد كل ماكان صلب ويسهل تقطيعه وكل ما اكتسب حراره صار لزج ويلصق في بعض وصعب تقطيعه
😓
اهم عامل مشترك بين ال
Trimming & sectioning
لازم البلوكات تكون بارده قدر الامكان لانه في النهايه احنا نتعامل مع شمع كل ماكان بارد كل ماكان صلب ويسهل تقطيعه وكل ما اكتسب حراره صار لزج ويلصق في بعض وصعب تقطيعه
😓
عشان كذا نخلي جنبنا صحن ثلج نحط البلوكات عليه فيه مويا (عامل مساعد في توصيل البروده للبلوكات) ❄️
ويلا راح نبداء تريمينغ 🔪✨ لازم نكون متألفين مع المايكروتوم في المرحله هذي وكيف نوصله للبلوك عشان مانغلط وندمر البلوك تماما لو قربناه زياده عن اللزوم 🌚
طيب بدأنا تريمينغ ولله الحمد متى نوقف ؟ لم نشوف تفاصيل النسيج كلك صارت واضحة جداً 🔍 (حاولت الاقيلكم صور توضح من النت بس للاسف مالقيت☹️) عموما تفاصيل النسيج بكل خطوطه بمسامه راح تكون جداً واضحه بالعين المجردة هنا تعرفون انكم لازم توقفون
نرجع نبرد العينات ونبداء نستعد لمرحله الcutting or sectioning
نكون حذرين واحنا ندخل في البلوك نمشي السيكشنز بسرعه اذا طلعت عندنا سكشنز حلوه من اول مره بدون مايكون فيها خطوط او متجهده خير وبركه نشيلها على الحمام المائي عشان ننقلها للسلايد😍👌🏼
نكون حذرين واحنا ندخل في البلوك نمشي السيكشنز بسرعه اذا طلعت عندنا سكشنز حلوه من اول مره بدون مايكون فيها خطوط او متجهده خير وبركه نشيلها على الحمام المائي عشان ننقلها للسلايد😍👌🏼
مو راضيه تتقطع معانا وجابتلنا تلف في الاعصاب ؟😭
📍نغير السكينة بوحدة جديدة🔪
📍نرجع نبرد البلوك الين ياخذ كفايته من البرد❄️
📍وفيه حركه اكتشفتها ساعدتني كثير 😂 وهي اني اقص كميه لا بأس بها في البدايه بعدين احطها على مرسام او ذراع فرشاه وابداء اجذبها اتجاهي بينما اقطع بسرعه 🤝
📍نغير السكينة بوحدة جديدة🔪
📍نرجع نبرد البلوك الين ياخذ كفايته من البرد❄️
📍وفيه حركه اكتشفتها ساعدتني كثير 😂 وهي اني اقص كميه لا بأس بها في البدايه بعدين احطها على مرسام او ذراع فرشاه وابداء اجذبها اتجاهي بينما اقطع بسرعه 🤝
ننقل السيكشنز الممتازه على حمام مائي فاتر اولاً (عشان يفرد سيكشنز الانسجه على سطح الماء ونقدر نمسكها بالسلايد بسهوله) وبعدين ننتقل على الحمام المائي الدافئ بعد ماصار السيكشن على السلايد (الشمع يذوب في الحراره والحمام المائي الحار يتخلص من الخطوط الرفيعه الي ماتنشاف)
من اصعب العينات في التقطيع هي العينات العظمية ☹️ (طيب كيف نتعامل معاها؟)
نحطها في محلول decalcification
ويتكون من
10-20% HCL
80-90% Distal water
ولازم نغسله ونبرده بعد مانعرضه لهذا المحلول وبعدها نبداء بتقطيع العينه 🔪
ويتكون من
10-20% HCL
80-90% Distal water
ولازم نغسله ونبرده بعد مانعرضه لهذا المحلول وبعدها نبداء بتقطيع العينه 🔪
بعدها ننقل الشرايح على رف مخصص وننقله عالفرن لإذابة الشمع الزائد ومن ثم ننقله الى جهاز الصبغ وبعد هذي المرحله نعمل coverslip وتصير الشرائح حاهزه للمعاينه 😍👌🏼✨
جاري تحميل الاقتراحات...